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JOSÉ CONDE HERNÁNDEZ
ALFREDO BENJUMEDA MAIRA, LOURDES FERNÁNDEZ DELGADO, ROCÍO PRIETO ROCHEL,
ANTONIO CHAPARRO MARTÍNEZ, ANA DE LA CALLE TORAL
Servicio Regional de Inmunología y Alergia Hospital Universitario Virgen Macarena. Sevilla

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CARACTERÍSTICAS BOTÁNICAS Y DISTRIBUCIÓN

Las oleáceas

     La familia de las oleáceas (Oleaceae), es la principal del orden de las Contortas, que engloba a unas 600 especies agrupadas en 29 géneros, se encuentra ampliamente distribuida por toda la cuenca mediterránea y algunas zonas de Norteamérica (California, Arizona) (Bousquet, 1985; Solomon y Jelks, 1997; Boluda, 1998), extendiéndose, en España, por toda la Península Ibérica, Islas Baleares e Islas Canarias.

     Son angiospermas, del grupo de las dicotiledóneas (subclase Magnolidae). Sus flores se polinizan por medio de insectos (entomófilas), así no tienen la necesidad de sintetizar tanto polen y pueden reducir el número de estambres. Sin embargo, la cantidad de polen que pueden liberar los olivos, pese a tener sólo dos estambres, es muy grande debido a que, por una parte, es cuantioso el número de flores y, por otra, porque parece haberse vuelto, al menos parcialmente, a un tipo de polinización más primitiva en la que interviene el viento (Feo Brito, 2000).

     La subfamilia de las Oleideae está constituida por un número relativamente escaso de especies, e incluye a varios tipos de árboles y arbustos. En Europa, las más importantes, con diferencia, son el Fraxinus (fresno) y la Olea (olivo y acebuche). Otras menos importantes son el Ligustrum (aligustre), la Forsythia, la Syringa (lilas), el Jasminun (jazmines) y la Phillyrea (labiernárgos) (Nilssom y Spieksma, 1994). En España, de todas ellas, sólo tres contribuyen, de una forma apreciable, a la carga atmosférica de pólenes, el fresno (febrero-marzo), el olivo (abril-junio) y el aligustre (julio), aunque este último, que se usa como árbol ornamental, de forma muy escasa produciendo síntomas sólo en situaciones de exposición local, como en las podas (Subiza, 1998).

     En Europa, el olivo se observa casi exclusivamente en la cuenca mediterránea, en los bosques y matorrales de las regiones secas y rocosas (Spieksma y cols. 1993), mientras que otras oleáceas como el Fraxinus y Ligustrum también están presentes en la Europa septentrional, con una estacionalidad que experimenta un desfase de aproximadamente un mes (Corsico, 1993). Sin embargo, pese a que el área de distribución geográfica del Fraxinus excelsior, el Ligustrum lucidum o la Phillyrea angustifolia es mucho más amplia que la de la Olea europaea, su agresividad como alergeno es menor y, por tanto, también lo es su incidencia en la alergia (Bousquet, 1984). Así, desde un punto de vista clínico, la Olea debe ser considerada como único representante de las Oleideae, al ser un importante inductor de enfermedades alérgicas en toda la cuenca del mediterráneo (Mellido,1985), siendo el responsable de hasta un 65% de sensibilizaciones, solo o bien asociados a otros pólenes (sobre todo el de gramíneas). Además, contiene, como hemos visto anteriormente, todos los alergenos de las demás especies, además de los suyos propios específicos (Tornero,1990).

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Fraxinus angustifolia

     En España, el olivo se extiende por toda la cuenca mediterránea, de tal manera que con frecuencia se considera como un buen indicador del clima mediterráneo y de los límites de la vegetación de tipo mediterráneo (Feo Brito, 2000). El olivo se extiende desde las Islas Baleares, donde es abundante, y se reparte por la mitad meridional y este de la Península, hasta Cataluña; penetra por el Centro hasta las laderas rocosas de las riberas del Tajo. Cultivado, su área de extensión es mayor, debido a que su alto aprovechamiento del terreno, el bajo coste de su explotación, y el hecho de ser muy resistente a las altas temperaturas y a la sequía le convierte en el cultivo por excelencia de amplias zonas de Andalucía, Castilla-La Mancha o Extremadura (Feo Brito, 2000). Sin embargo, en el interior peninsular, los inviernos rigurosos producen grandes daños en las plantaciones (Feo Brito, 2000). La distribución del olivo va perdiendo importancia según avanzamos al norte, siendo tan sólo testimonial en el macizo galaico y cornisa cantábrica (Subiza,1998). Son especialmente notables los acebuchares de las provincias de Cádiz y Huelva (Feo Brito, 2000).

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Lingustrum lucidum

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Olea europaea

     En la Península Ibérica e Islas Baleares hay una sola especie del género Olea, representada por una raza denominada Olea europaea, que tiene dos variedades, la Olea europaea (el olivo cultivado) y la Olea sylvestris (olivo silvestre o acebuche). En las Islas Canarias hay, además, una raza africana de olivo llamada O. europaea subespecie africana (Feo Brito, 2000).

     El olivo, es un árbol o arbusto perennifolio, de hasta 15 m de altura, con un tronco grueso, robusto, nudoso y retorcido o tortuoso, con una corteza grisácea finamente fisurada. Tiene hojas simples, lanceoladas, opuestas y enteras, de color verde-grisáceo oscuro, coriáceas, de 1 a 7 centímetros de largo por 0,5 a 1 cm de ancho, con escamas blanco-plateadas de forma estrellada por el envés que le dan un aspecto plateado a esa parte de la hoja.

     Las flores son pequeñas, blanquecinas y poco vistosas, regulares y se agrupan en ramilletes terminales en forma de racimos (racimos axilares). Son hermafroditas, y raramente unisexuales. El cáliz es de una sola pieza, persistente, con 4 lóbulos o dientes, que van a modo de valva en el capullo. La corola está constituida por 4 pétalos soldados en tubo (estructura tubular-embudada), es hipocraterimorfa (con un tubo largo, delgado, y los lóbulos casi horizontales) y caduca. La flor del olivo tiene dos estambres (que alternan con los pétalos, unidos por lo general al tubo de la corola), con unos filamentos generalmente cortos, y anteras con dos cavidades (que se abren hacia dentro por hendiduras laterales). El pistilo de la flor está formado por dos hojas carpelares soldadas; un ovario súpero, rodeado en la base, a veces por un disco nectarífero, con dos cavidades (cada una con 2 o más rudimentos seminales colgantes), con una sola envuelta o tegumento, unidos a placentas situadas en el eje o en el ápice; y un estilo simple, terminal, con estigma entero, bilobado o bífido. El perianto es doble. El fruto, la aceituna, es una drupa oleaginosa, de forma elíptica, verde, que se torna negruzca en la madurez.

     El olivo crece de forma natural en los bosques esclerófilos mediterráneos (encinares, alcornocales, quejigares) o en los matorrales que resultan de su degradación (junto al lentisco, mirto, palmito y espino negro), en todo tipo de terrenos. Aguanta muy bien el calor y la sequía, pero es sensible al frío (no tolera temperaturas inferiores a –9 ºC o una temperatura media de sólo 3 ºC durante el mes más frío). Al penetrar hacia el interior de la Península no sube mucho su altitud, refugiándose en las laderas más soleadas y más abrigadas del frío; crece en altitud desde el nivel del mar hasta unos 1.500 m.

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Olea europaea

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MORFOLOGÍA DEL POLEN Y POLINIZACIÓN

     La floración y polinización suele acontecer en mayo-junio, aunque el periodo de máxima concentración polínica suele ser bastante breve (Spieksma, 1993). En España, la polinización de la Olea se prolonga durante los meses de abril a julio, comenzando casi un mes antes en las provincias más meridionales (Elche), y siendo globalmente el mes más álgido mayo-junio (depende del año) (Subiza, 1998). Los niveles máximos se alcanzan entre la segunda quincena de mayo y primera de junio, favorecidos por el incremento de las temperaturas al final de la primavera (Feo Brito, 2000).

     Es característico de este polen que presente amplias variaciones interanuales en su presencia atmosférica (Subiza, 1998). Se ha descrito que la concentración atmosférica anual de polen de olivo puede relacionarse con el llamado “fenómeno de la alternancia de cultivos”, por el que se alternan años con numerosas emisiones de polen con otros en los que se observa una escasa concentración polínica (Corsico, 1993); este fenómeno se produce sobre la base de la competencia entre las frutas de una temporada y las flores de la temporada siguiente por las sustancias nutritivas de la planta, y que tendría como consecuencia una alternancia en la producción: un rendimiento alto de flores y frutas se alterna con otro bajo en pólenes y producción; no obstante, la lluvia estacional o la inestabilidad atmosférica (vientos/calma) son también factores muy determinantes en la cantidades de polen recolectado (Feo Brito, 2000). En España este fenómeno se ha observado en Toledo y Ciudad Real.

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Cultivares de olivo

     En la década de los ochenta se inició en nuestro servicio el estudio de distintas variedades (cultivares) de Olea europaea. En su tesis doctoral, González Quevedo (1984) encontró diferencias significativas en actividad y potencia alergénica, tanto por técnicas in vitro (RAST directo) como in vivo (test cutáneo) entre las (doce) variedades de olivo estudiadas, en las que observó claras diferencias morfológicas macroscópicas (máxime cuando se comparan sus frutos), pero no en la cobertura de los granos de polen, examinados mediante microscopía óptica y electrónica. Siguiendo en esta línea de estudio, Conde Hernández (1994), en su tesis doctoral, objetivó una mayor actividad alergénica en los extractos de las variedades cornezuelo, cornicabra, gordal, ojiblanco, verdial y, sobre todo, manzanilla (de alta importancia agronómica en nuestra región) que en el resto de las variedades estudiadas, y confirmó que el alergeno mayor del polen de Olea europaea es común en las variedades con amplia actividad alergénica y está ausente en aquellos con escasa potencia alergénica (aloreña, callosina, zarzaleña). Recientemente, Casanovas y cols. (1998) han comprobado que distintas variedades de olivo como el acebuche, el carrasqueño, el ojiblanco, el manzanillo, el marteño o nevado y el picual presentan características antigénicas y alergénicas distintas, siendo estas variaciones más cuantitativas que cualitativas, pudiendo estar implicados también factores como la fecha de recolección, la composición de la tierra de los distintos cultivares y la climatología. González Quevedo (1984) también pudo corroborar en su estudio sobre doce variedades de olivo que el ecoambiente y los cuidados culturales, son factores con capacidad de inducir cambios cualitativos, fundamentales desde el punto de vista alergológico, en una variedad determinada, lo cual podría abocar con el tiempo en el reconocimiento de una nueva variedad agronómica. Experimentalmente, la cromatografía por filtración en gel es una técnica útil para conocer la huella específica de especie del polen de olivo, así como para identificar las distintas variedades (Conde Hernández,1994).

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Polen

     Tiene una forma esferoidal prolata, con un contorno ecuatorial subtriangular y un contorno meridional circular o ligeramente elíptico, un tamaño que oscila entre las 18 y las 22 micras (pequeño), trizonocolporado, con una exina gruesa, reticulada, regular y con columelas muy visibles, y una entina fina con uncus (Cómite de Aerobiología de la SEAIC). En cuanto a las aperturas se trata de pólenes tricolporados con colpos muy largos.

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Polen de Olea

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FRACCIONES ALERGÉNICAS DEL POLEN DE OLIVO

     La mayoría de los trabajos coinciden en señalar la compleja mezcla de proteínas alergénicas que contiene un extracto de polen de olivo. Hasta el momento se han identificado, aislado y caracterizado sólo nueve de las más de veinte bandas detectadas en los extractos de polen de olivo. El alergeno mayor o principal es la Ole e 1, que muestra una frecuencia de unión a la IgE en pruebas in vitro del 62%. Además se han aislado, purificado y caracterizado, la Ole e 2, la Ole e 3 (que se comporta como un alérgeno mayor en determinadas poblaciones) (Batanero, 1996; Ledesma, 1998), la Ole e 4 (Boluda, 1998), la Ole e 5 (Boluda, 1998), la Ole e 6 (Batanero, 1997), la Ole e 7 (Tejera, 1999; Ledesma, 1998), la Ole e 8, y, recientemente, la Ole e 9 (Huecas, 2001), todas ellas con masas por debajo de 35 kDa. Sin embargo, en distintos trabajos sobre extracto de polen de olivo se han descrito polipéptidos de mayor peso molecular que todavía no han sido caracterizado. Así, en un estudio sobre reactividad cruzada entre el polen de olivo y el polen de otras especies no relacionadas, González y cols (2000) han descrito un nuevo alergeno, que parece ser específico del polen de olivo, con una masa molecular de 45 kDa, y con una potencia similar a la de la Ole e 1. También se han demostrado polipéptidos de 42 kDa, 60-65 kDa y 70 kDa, y alguno de ellos parecen mostrar una alta significación clínica, muy cercana a la de la Ole e 1 (Huecas, 2001). En general, y a un nivel clínico, la importancia o incidencia específica de cada alergeno depende de varios factores, entre ellos el área geográfica.

     Al principio de la década de los ochenta se empezaron a publicar los primeros trabajos sobre la caracterización y fraccionamiento del extracto de polen de Olea europaea. Vela y cols. (1982) llevaron a cabo el fraccionamiento de un extracto de polen de olivo, inicialmente mediante una técnica de electroforésis cruzada, y detectaron diez fracciones antigénicas. Posteriormente, mediante una filtración en gel de Sephadex G100, obtuvieron dos fracciones, de pesos moleculares 160.000 y 65.000 daltons respectivamente. Evaluaron la actividad alergénica de las fracciones encontradas mediante dos técnicas in vitro (un test de radioinmunoensayo en tubo de poliestireno (PTRIA) y un test de degranulación de basófilos (BDT) y una técnica in vivo (test cutáneos). Todos los test indicaron que la fracción más reactiva correspondía al pico con un peso molecular de 65 kDa.

     Un año después, en 1983, Blanca y cols. publicaron los resultados de un trabajo en el que como Vela y cols. (1982) pretenden caracterizar y purificar el polen del olivo, inicialmente mediante una técnica de isoelectroenfoque (IEF), con la que obtuvieron finalmente veinte fracciones antigénicas. Posteriormente, haciendo test cutáneos para seleccionar un grupo de pacientes, y mediante la aplicación de RAST y RAST de inhibición con el suero de esos pacientes, detectaron un antígeno mayor y otros menores. El antígeno mayor detectado era una proteína ácida con un pI (punto isoeléctrico) de 6, que según los resultados de la electroforesis SDS-PAGE, estaba compuesta por dos cadenas polipeptídicas, de pesos moleculares 15 y 17 kDa respectivamente, posiblemente unidas por un enlace no covalente. La mayoría de los otros alergenos detectados fueron también proteínas ácidas (aunque también encontraron algunas proteínas básicas con actividad alergénica). Los estudios de RAST de inhibición mostraron una considerable reactividad cruzada entre las dos fracciones obtenidas por IEF. En un trabajo posterior, Blanca y cols., siguiendo el método utilizado previamente por King y cols. con un extracto de polen de ambrosía, obtienen mediante una cromatografía de intercambio iónico con resina débil, seguida de una filtración en gel con Sephadex G150 de la fracción ácida, una serie de proteínas con actividad alergénica tanto en los picos ácidos como en los básicos. En el ácido encuentra tres fracciones, de 20, 15 y 12 kDa, con una actividad alergénica demostrada por tests cutáneos y RAST de inhibición, así como una gran reactividad cruzada entre ellas, que puede corresponder, según los autores, a un determinante alergénico común (Blanca, 1984).

     En 1987, Rubio y cols. consiguieron purificar el alergeno mayor del polen de Olea europaea (por ser responsable de más del 70% de la reactividad de los sueros probados de enfermos sensibles a Olea europaea) mediante una cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), y en 1988, Lauzurica y cols. trataron de caracterizarlo. Para ello realizan una cromatografía de intercambio iónico con DEAE-Sepharose CL-6B, con fuerza iónica escalonada, obteniendo una serie de fracciones, de las cuales las más alergénicas corresponden a 1M y O,5M. A esta última, por razones de rendimiento alergénico, le practican una cromatografía de afinidad con sepharosa-concavalina A, obteniendo dos fracciones, de las cuales la más activa es la de glicoproteína (GLP 500). Por filtración de la GLP 500 en ACA-SO con alta fuerza iónica obtienen un péptido, que, según los autores, corresponde a un hapteno menor de 7 kDa (Lauzurica y cols., 1988). A finales de la década de los ochenta y principio de los noventa, Weeler y cols., entre ellos Lauzurica, identifican un alergeno mayor del polen de olivo con un peso molecular comprendido entre 55 y 60 kDa y que pudiera estar compuesto por subunidades de 17, 19 y 21 kDa, obtenidas por separación de HPLC y analizando las fracciones por anticuerpos monoclonales e immunoblotting SDS-PAGE. Obtienen una respuesta positiva de enfermos sensibles al olivo en un 70-80% para la banda de peso molecular 19 kDa, obtenida por immunoblotting SDS-PAGE, y para la banda de 17 kDa, y menos proporción para la banda de 21 kDa, obtenida por anticuerpos monoclonales (Wheeler, 1987, 1990).

     Lauzurica y cols., siguiendo con su línea de estudio, designan al antígeno mayor del polen de olivo como antígeno Ole e 1, que obtiene tras separación por cromatografía de intercambio iónico y después por gel de filtración, testándolo posteriormente por RAST de inhibición. Presentó mediante IEF una gran banda a pH 5,3 y dos menores a 5,6 y 5,0, con una banda de 17 y 19 kDa por SDS-PAGE en segunda dimensión. Mediante immunoblotting las bandas de 17, 19 y 42 kDa reaccionaron con IgE específicas de sueros de pacientes sensibles, así como anticuerpos monoclonales reaccionaron también con las de 17 y 19 kDa y con tres arcos más obtenidos por CIE (Lauzurica, 1988; Pini, 1989).

     La Ole e 1 es una glicoproteína ácida de 145 aminoácidos y un peso molecular de 16,3 kDa (DeCesare, 1993). Constituye un gran porcentaje de la proteína total del polen (Rodríguez, 2000). Es el alergeno mayor del polen de olivo, al ser sensibles más del 70% de los pacientes alérgicos. En un trabajo de J. Martínez (no publicado) la incidencia de hipersensibilidad a la Ole e 1 en un grupo de 120 pacientes alérgicos al polen de olivo del sur y este de España fue del 54% (Asturias, 1997). Lombardero y cols. demostraron a principio de la década de los noventa que los extractos de olivo deplecionados de Ole e 1 mantiene menos del 5% de su actividad original (Lombardero, 1992). Con un extracto de polen de olivo formado por Ole e 1 o una combinación de Ole e 1 y otro de los alergenos principales, podrían conseguirse eficacias en el diagnóstico próximas al 80 y 95%, respectivamente (Rodríguez, 2000).

     El estudio de la secuencia aminoácida del cDNA amplificado revela una considerable heterogeneidad para el alergeno Ole e 1 que podría comprender una familia de proteínas, incluyendo al menos nueve miembros (dos secuencias proteicas son codificadas por dos pares de clones). Y esto se añade a la observación de múltiples iso-formas en la proteína nativa, codificadas a partir de la existencia de múltiples moléculas de mRNA derivadas del cDNA (Villalba. 1994, Lombardero, 1994). La proteína Ole e 1 muestra microheterogeneidad en varias posiciones de su estructura primaria (Villalba, 1993), concretamente, se ha demostrado en 11 posiciones en la secuencia aminoácida completa, localizándose principalmente en dos segmentos, en la posiciones 38 a 51 y en las 83 a 99. En 1990, Barber y cols. publicaron las conclusiones de un trabajo en el que señalan que han encontrado in vitro una marcada variación de la potencia alergénica entre seis lotes de polen de olivo, mediante RAST de inhibición, en correlación directa con el contenido de un componente multimérico de 55 kDa que se obtuvo con HPLC. Los patrones electroforéticos mostraron diferencias en una banda heterogénea de 20 kDa y con un pI de aproximadamente 5, que probablemente represente, en opinión de los autores, la forma monomérica del alergeno mayor (Barber y cols., 1990). Dos años después, en 1992, Lombardero y cols. publican que existen dos anticuerpos monoclonales que reaccionan con Ole e 1. El alergeno fue purificado por cromatografía de afinidad observándose dos bandas de 18 y 20 kDa por SDS-PAGE. Su actividad alergénica la midieron por tests cutáneos y liberación de histamina, objetivándose una respuesta similar a la del extracto total (Lombardero, 1992).

     Su síntesis se realiza exclusivamente en el tejido polínico y no en otros tejidos como las hojas, tallos o fruta, pudiendo explicar este hecho la ausencia de hipersensibilidad de los pacientes alérgicos al polen de olivo cuando ingieren aceitunas o aceite de oliva (Villalba, 1994).

     La Ole e 1 está integrada por dos bandas, una de 20 y otra de 18,5 kD, y un tiene un pI por IEF que varía entre 5,3 y 5,6 (en 1994 González –Quevedo encuentra que el punto isoeléctrico del antígeno mayor del polen de olivo, determinado por LEF, se encuentra alrededor de 5,5, al estar presente en el 91% de los extractos estudiados, apoyándo los datos bibliográficos existentes hasta ese momento). La banda de 20 kDa es la variante glicosilada de la proteína (que muestra dos variantes), mientras que la banda de 18,5 kDa corresponde a la variante no glicosilada (Villalba,1994; Asturias, 1997).

     Villalba y cols. consiguieron distinguir, a principios de la década de los noventa, tres subfracciones (por HPLC de fase reversa) en el antígeno mayor de polen de olivo, que reaccionaban con suero de enfermos sensibles al olivo, con una respuesta similar, y obtuvieron la secuencia de los primeros veintisiete aminoácidos de la porción N-terminal, sin encontrar diferencias significativas en la composición de aminoácidos de estas tres proteínas (Villalba, 1990.).

     El papel biológico de la Ole e 1 en el olivo es desconocido, aunque al tener cierta similitud estructural con polipéptidos codificados por genes de otras especies de pólenes no relacionados, que juegan un papel en la maduración y germinación del polen, esto podría sugerir su función biológica (Villalba. 1993). En la actualidad, se piensa que puede estar envuelta en la hidratación del polen durante la germinación (Huecas, 2001).

     La Ole e 1 (en relidad Ole e 1-like) se ha observado en otras especies de la familia de las oleáceas, entre ellas el fresno, la Forsythia y la Syringa (Obispo, 1993). Hasta la actualidad, se han aislado y secuenciado dos alergenos Ole e 1-like, uno en la Syringa (Syr v 1) (Batanero, 1994) y otro en el Ligustrum (Lig v 1) (Batanero, 1996), cuya alta similitud de sus estructuras polipeptídicas puede explicar la reactividad cruzada observada. Es remarcable el hecho de que la Ole e 1 muestra secuencias similares con otras proteínas de pólenes de especies no relacionadas filogenéticamente, así con los polipéptidos codificados por el gen LATS 52 del tomate la secuencia de aminoácidos de la Ole e 1 muestra un 36% de identidad, y un 38% con los polipéptidos codificados por el gen Zmc 13 de los pólenes del maíz (Villalba, 1993).

     La Ole e 2 fue aislada, caracterizada y purificada a finales de la década de los ochenta por Lauzuriza y cols. (1988), y clonada por Asturias y cols. a finales de la década de los noventa (1997). La Ole e 2 es una profilina, con un peso molecular de 8 kDa y un pI que varía entre entre 3,6 y 4. Al igual que ocurre con la Ole e 1, también se ha observado heterogenidad, y se han descrito diversas isoformas, incluso en la misma planta.

     Cabe recordar que las profilinas, que son proteínas fijadoras de actina, constituyen una ubicua familia de proteínas que controlan ciertas funciones en las células eucariotas (Theriot y Mitchison, 1993), entre ellas una participación activa en los procesos de movimiento citoesquelético celular subyacente a múltiples fenómenos de motilidad (Martínez y Bartolomé, 2000), y que son importantes alergenos en muchos pólenes de árboles, hierbas y malezas (por su amplia incidencia se llaman panalergenos).

      La Ole e 2 es reconocida aproximadamente por un 20% de todos los pacientes alérgicos al polen de olivo (Valenta, 1991, 1992). En un estudio realizado por Martínez y cols. (1998) con SDS-PAGE inmunoblotting con extracto completo de polen de Olea europaea y una muestra de de 120 sueros de pacientes alérgicos a dicho polen, se encontró, tras una adecuada identificación de la banda de profilina, que el 27% de los sueros era reactivo a ella. Utilizando los mismos sueros y membranas con sólo la profilina recombinante de O. Europaea (rOle e 2) el grado de reconocimiento fue del 25 % (Asturias, 1997, Martínez, 1998). En otro estudio in vitro con profilina natural purificada, realizado por Ledesma y cols. (1998), se obtuvo un porcentaje prácticamente idéntico. En un trabajo de Martínez y Monteseirín (no publicado) en el que se evaluó la reactividad in vivo de la profilina natural purificada del polen de olea europaea, de 45 pacientes alérgicos al olivo, 9 mostraron un prick positivo (20%), idéntico porcentaje al obtenido en pruebas de provocación conjuntival, mientras que en pruebas de provocación nasal se registraron un 26% de positividades (Martínez y Asturias. 2000).

     La Ole e 3, por su parte, pertenece a la familia de las polcalcinas, demostrándose reactividad cruzada entre la Ole e 3 y otras estructuras proteicas de la familia de las polcalcinas en otras oleáceas, las gramíneas (in vitro se ha observado una asociación entre el rOle e 3 y el polen de gramíneas), el pino y el ciprés (Ledesma, 1998). Es una proteína con un peso molecular de 9,5 kDa, y que lleva asociada dos puntos de unión para el Ca++ (se han descrito proteínas fijadoras de calcio también en otros pólenes, como el Cyn d 7, Bet v 4, Phl p 7, Bra r 1 y Aln g 4). Se ha sugerido que podría tener relación con las funciones reproductivas del polen (Boluda,1998). Tiene un grado de reconocimiento por la IgE del 20% (Boluda, 1998), que llega a ser del 50% en áreas con alta densidad de olivares (Feo Brito, 2000). A nivel clínico, es un alergeno relevante, después, claro está, de la Ole e 1. En España, parece jugar un importante papel en la polinosis a olivo principalmente en el área de Madrid (Ledesma y cols. 1998, Quiralte y cols., 1998).

     La Ole e 4 fue descrita a finales de la década de los noventa por Boluda y cols. (1997). Es una proteína con un peso molecular de 32 kDa, que no presenta puentes disulfuro ni enlaces no covalentes en su estructura. Su función es desconocida. Tiene al menos dos isoformas en el rango del pI de 4,65 a 5,1. In vitro, se ha comprobado que en el inmunoblotting la Ole e 4 fija mayor cantidad de IgE que la Ole e 5 (80% frente a 35%), pero igual cantidad en ensayos en fase sólida. En experimentos de IgE inhibición, la Ole e 4 muestra una relativa mayor capacidad de inhibición que la Ole e 5 (Boluda, 1998). No tiene homología con otras proteínas conocidas.

     A la vez que la Ole e 4, se describió la Ole e 5, que es una proteína con un peso molecular de 16 kDa. No presenta puentes disulfuro ni enlaces no covalentes (Boluda, 1998). El estudio de la secuencia de aminoácidos N-terminal demuestra un alto grado de homología con la enzima superóxido dismutasa, presente en algunas especies de plantas. Tiene, al menos, cinco isoformas con puntos isoeléctricos en el rango que va desde 5,1 a 6,5, similar a la Ole e 1. Muestra un mayor grado de polimorfismo que la Ole e 4. Es un alergeno menor, con una frecuencia de unión a la IgE del 35%.

     La Ole e 6 fue purificada, secuenciada y caracterizada por Batanero y cols. a finales de la década de los noventa (1997). Es una proteína rica en cisteína. Tiene un peso molecular de 5,8 kDa. En SDS-PAGE 10 kDa, con pI 4,2. No tiene homología con otros polipéptidos conocidos, y presenta una frecuencia de unión a la IgE del 15% (con diferencias dependiendo del área: 10-55%) (Feo Brito, 2000). Su prevalencia parece estar relacionada con el área geográfica. En una comunicación reciente presentada por Quiralte y cols. (1998), se señala que la Ole e 6, es junto con la Ole e 1, un alergeno mayoritario en la población de pacientes de Jaén con polinosis por olea.

     La Ole e 7 fue identificada y purificada por Tejera y cols. a finales de la década de los noventa (1999), encontrando que éste alergeno tiene una significativa importancia clínica debido a que el 47% de los pacientes considerados en el estudio presentaron sensibilidad a este alergeno. Se sabe que es una proteína muy soluble, un polipéptido polimorfo de 88 aminoácidos con un peso molecular de unos 10 kDA, que el número de isoformas descritas es alto y que su secuencia aminoácido N-terminal no demuestra similitud con ninguna otra proteína conocida, y al igual que ocurre con la Ole e 6, su prevalencia parece estar relacionada con el área geográfica. Así, se ha observado una prevalencia mayor del 60% en pacientes de Jaén, mientras que es menor del 20% en pacientes en el área de Madrid.

     De la Ole e 8 se sabe que es una proteína con un peso molecular de 18,8 kDa, y, como la Ole e 3, lleva asociada dos sitios de unión para el Ca++ (Huecas, 2001). Presenta coincidencias en algunas de sus propiedades estructurales y funcionales con otras proteínas del polen de olivo como son la calmodulina o los dímeros de la Ole e 3 (Rodríguez, 2000). Suele constituir menos del 0,05% del total proteico de los extractos utilizados en el diagnóstico e inmunoterapia, y precisamente debido a su exigua cantidad en el polen de olivo sólo ha sido parcialmente purificado (Rodríguez, 2000).

     Finalmente, la Ole e 9, que ha sido aislada, caracterizada y secuenciada muy recientemente por Huecas y cols (2001). Es un alergeno mayor del polen de olivo. Es una 1,3-beta-glucanasa (una enzima hidrolítica densamente localizada en la mayoría de las plantas pero de función biológica desconocida) larga (tiene un peso molecular de 46,4 kDa) y ácida, que exhibe un bajo pero significativo polimorfismo estructural. Presenta una similitud en su secuencia aminoácida del 39% con la enzima larga y moderadamente ácida del trigo. Es la primera glucanasa larga y ácida descrita con propiedades alergénicas (sin embargo, una glucanasa corta y básica del látex ha demostrado su capacidad para inducir alergia, la Hev b 2). Igual que sucede con otros alergenos, el Ole e 9 es altamente soluble y se libera fácilmente después de la hidratación del polen.

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REACTIVIDAD CRUZADA ENTRE OLEÁCEAS

     En 1984, Moneo y Díaz publican los resultados de un trabajo en el que estudian la reactividad cruzada entre oleáceas mediante la técnica de enzimoinmunoensayo reverso, encontrando una inhibición inducida por el extracto de Olea europaea del 93± 3,8%. Un año después, Bousquet y cols. publican los resultados de un trabajo sobre reactividad cruzada entre cuatro tipos de oleáceas (Olea europaea, Fraxinus excelsior, Ligustrum vulgare y Phillyrea angustifolia) mediante RAST de inhibición, isoelectroenfoque e inmunoelectroforésis cruzada tándem (CIE), detectando un alto grado de reactividad cruzada, pero no una total identidad, entre estas especies de pólenes. En base a estos importantes trabajos, ya se sabe que en la mayoría de los pacientes existe una importante reactividad cruzada entre estas especies de oleáceas (Bousquet, 1985; Kernerman, 1992), siendo con mucho la más alergénica, pese a su corto periodo de polinización, la Olea europaea, que contiene todos los alergenos que comparten el Fraxinus y el Ligustrum, pero, además, posee alergenos específicos de especie, que corresponden, aproximadamente, al 30% del total de la actividad alergénica del extracto de polen de olivo (Tornero, 1990).

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Polen de Olea

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REACTIVIDAD CRUZADA CON OTROS PÓLENES

     Se ha descrito reactividad cruzada entre el polen de olivo y los pólenes de la familia de las oleáceas, así como con los pólenes de especies no relacionadas filogenéticamente, como las gramíneas, el Lolium perenne, la Artemisia vulgaris y la Betula verrucosa (González, 2000).

     Las áreas de distribución geográfica de la Olea y las gramíneas las aproximan especialmente, debido al hecho de que las gramíneas, que tiene una enorme difusión, se multiplican bien en zonas de crecimiento de las oleáceas. Esto, y no la presencia de antígenos comunes, supone el hecho de que muchas personas alérgicas presenten síntomas de sensibilidad simultánea a una o más especies de ambas familias (Baldo, 1992), que se encuentran taxonómicamente bastante alejadas y que no tienen ningún alergeno importante que presente reactividad cruzada. Sin embargo, González y cols. (1987) describieron hace algunos años un alergeno minoritario, de alta movilidad, común a la Olea europaea y a las gramíneas Lolium perenne, Cynodon dactylon, Phleum pratense y Phragmites communis.

     Aunque se ha descrito cierta reactividad cruzada entre el polen de Olea europea y el Chenopodium album, tanto in vivo (se ha observado que el Chenopodium, que presenta unos recuentos insignificantes en la atmósfera de nuestra zona, produce pruebas cutáneas positivas en más del 88% de los pacientes alérgicos al polen de olivo) como in vitro (Gómez y cols. 2001), Navarro y cols. (2001) no encuentran que en la práctica se aprecie asociación entre ambos pólenes, y tampoco es más frecuente la asociación olivoChenopodium en relación a la de gramíneas-Chenopodium.

     Vela y cols. (1982), en un trabajo donde se pretendía llevar a cabo el fraccionamiento de un extracto de polen de olivo, encontraron dos fracciones antigénicas comunes entre el Lolium perenne y Olea europaea, pero no detectaron reactividad cruzada con el método de inhibición ni con el test de radioinmunoensayo en tubo de poliestireno.

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POLINOSIS

Epidemiología de la polinosis por polen de olivo

     Se caracteriza por su extremada variabilidad, de una parte geográfica, ya que, al tratarse de una planta cultivada, se observa sobre todo en las zonas geográficas donde existen más olivares, áreas en las que pueden alcanzarse concentraciones muy elevadas en proporción a la intensidad de la planta (Macchia y cols., 1991), y de otra en la concentración atmosférica anual, en base al ya comentado fenómeno de la alternancia de cultivos, por el que se pueden alternar años con numerosas emisiones de polen, con otros en los que se observa una escasa concentración polínica (Corsico, 1993).

     En Europa, en las zonas geográficas de gran exposición, se encuentra una sensibilización al polen de olivo en un 30-40% de los pacientes polinicos, asociada en un 80% de los casos a otros pólenes (Corsico,1993). En España, según datos obtenidos del estudio epidemiológico “Alergologica”, que llevó a cabo la SEAIC en 1992, y que es de referencia, la alergia al polen de olivo es más frecuente en las zonas del interior peninsular (donde el polen de olivo es el responsable del 57,8% de las polinosis) y en la zona sur (donde es responsable del 42,3%). Jaén es la ciudad donde se observan los picos más altos de todo el territorio nacional (hasta 4.000 granos/m³), hecho que se explica porque esta región dedica el 62% de su extensión geográfica al cultivo de olivares (en la provincia de Jaén, la extensión de olivares, para hacernos una idea, equivale al conjunto de toda Grecia), la sensibilización al polen de olivo es muy elevada, con una prevalencia del 97% del total de pacientes con polinosis, aunque en más del 80% de los casos se trata de pacientes polisensibilizados (Peralta,1994; Quiralte, 1998). Otras provincias muy olivareras son Córdoba, Sevilla (los olivares abundan en las afueras de la ciudad, a la que prácticamente rodean), Granada y Málaga.

     Según datos obtenidos de un trabajo de Chaparro y Conde (1999), en Sevilla, en 1995 destacó por número de pólenes el de oleáceas, con una incidencia del 34,6 % (las gramíneas, con mucha importancia en la comunidad de Madrid, representaron ese año tan sólo un 6,8%). En cuanto a sensibilizaciones, destacaron en primer lugar el elevado número de sensibilizaciones a polen de olivo (90%), y en segundo lugar, y a corta distancia, la sensibilización al polen de gramíneas (87%), incluyendo Dactylis y Cynodon. Sin embargo, en cuanto a las monosensibilizaciones, el mayor número correspondió al polen de las gramíneas (27%), seguido por el polen de olea (5%). En cuanto a las asociaciones, la más frecuente fue la del polen de gramíneas y olea (37%).

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Clínica

     Según los datos de “Alergológica” el motivo de consulta de los pacientes polínicos en un 89,7% de los casos son síntomas nasooculares, seguido por tos, en un 44% de los casos, disnea, en un 43,7% de los casos, y ruidos torácicos, en un 32,3% de los casos. La alergia polínica (26,5%) es la causa del 51,8% de los casos de rinoconjuntivitis y del 30,2% de los casos de asma bronquial, por lo que constituye la causa más frecuente de rinoconjuntivitis y la segunda de asma bronquial; y considerando sólo los casos de etiología alérgica, la polinosis causó el 42,3% de los casos de rinoconjuntivitis y el 34,2% de los casos de asma bronquial. Además, se calcula que el 30% de los pacientes con rinoconjuntivitis polínica tiene además asma bronquial (es raro que ésta última se presente aislada). Se ha establecido que concentraciones de polen de Olea entre 150-400 granos/m³ son capaces de reactivar a la mayoría de los pacientes clínicamente sensibilizados (Florido, 1999, Feo Brito, 2000).  

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Polen de Fraxinus

     En el caso del polen de olivo, es la rinoconjuntivitis su principal afectación; acompañándose de asma bronquial en menos de la mitad de los casos (40%) (Corsico, 1993; Subiza, 1998). Según los resultados obtenidos por Orta y cols. (2001) de una muestra de 600 pacientes con clínica de polinosis, la presentación de síntomas en los pacientes monosensibles (71 pacientes) fue de rinoconjuntivitis en el 97,18%, asma en el 40,8% y ambas patologías en el 30,02%; y en los pacientes monosensibles (529 pacientes) fue de rinoconjuntivitis en el 98,29 %, asma en el 36,48 % y ambas patologías en el 35,34 %. A nivel genético, se ha observado una asociación entre la alergia al polen de olivo y los alelos del MHC clase II DQB1* 0201 y DRB1* 0701 (Fernández-Caldas y Pérez, 2000) Según “Alergológica” la rinitis alérgica afecta fundamentalmente a adolescentes y adultos jóvenes, con un pico máximo de incidencia entre los 15 a 24 años. Los estudios disponibles señalan que la alergia al polen causa entre un 50 y un 75% de las mismas en los individuos adultos, reduciéndose esta cifra a menos de la mitad en los niños. Por orden de frecuencia, los pólenes fueron los agentes etiológicos más importantes (57%), sobre todo en región Centro, Sur, Murcia y Aragón. Dentro de los pólenes, la familia más frecuentemente implicada fue la de las gramíneas (75%) seguida por el olivo (45%). Por regiones, destaca la concentración de los enfermos sensibilizados a Olea europea en la zona sur, mientras que en Aragón y zona centro la mayoría de los pacientes comparte esta sensibilización con otra a gramíneas.

     Según los datos de “Alergológica”, el asma bronquial extrínseca afecta fundamentalmente a adolescentes y adultos jóvenes con un pico máximo de incidencia entre los 15 a 24 años. Por orden de frecuencia los ácaros fueron los agentes etiológicos más importantes (53%), seguidos por los pólenes (34%) y los epitelios (15%), que en los países escandinavos se sitúan en primer lugar por orden de frecuencia, incluso por delante de los ácaros. El porcentaje de sensibilización a pólenes es más pronunciado en zonas de interior, siendo la zona Centro, con un 77%, el caso extremo. En función de la zona de residencia del paciente, el porcentaje de hipersensibilidad al polen en zona rural fue del 29%, en zona semiurbana del 32% y en zona urbana del 33%. Dentro de los pólenes, la familia más frecuentemente implicada fue la de las gramíneas (71%) seguida por el olivo (42%). La mayoría de los pacientes estaban polisensibilizados. Las gramíneas dominan en todas las comunidades, si bien en el sur la frecuencia de sensibilización a olea casi las iguala. En la región Centro, la sensibilización a olivo es también muy importante, alcanzando un 59%.

     Teniendo en cuenta el grado de la gravedad del asma, la hipersensibilidad al polen de olivo se asocia con asma leve en el 55,1% de los casos, con asma moderado en el 38,8 % de los casos, y con asma grave en el 6,1% de los casos.

     Por sexos, y en general, la alergia al polen de olivo es más frecuente en mujeres (hasta el 70% en algunas series) (Feo Brito y cols. 2000), aunque depende de la zona. En un trabajo realizado por Navarro y cols. (2001) donde se pretendían estudiar las características clínicas de la sensibilización a polen de olivo en Sevilla y Zaragoza, en la distribución por sexos predomina el sexo femenino en Sevilla y los varones de Zaragoza. Según los datos del estudio epidemiológico de referencia “Alergológica”, la sensibilización al polen de olivo, en general, es discretamente más frecuente en hombres (un 52% sobre un 48% de mujeres).

     Por edades, y según “Alergológica”, la alergia al polen de olivo es más frecuente entre los 15-30 años, con una incidencia del 47,4% (seguida de pacientes entre los 6-14 años, con una incidencia del 25,9%, pacientes mayores de 30 años, con una incidencia del 22% y, finalmente, pacientes menores de 6 años, con una incidencia de tan sólo un 4,7%).

     En ocasiones, se ha observado una persistencia de la clínica entre los pacientes alérgicos a polen de olivo más allá de los meses álgidos. La explicación que se da a este fenómeno es que los altos niveles de polen en las comarcas olivareras podrían prolongar la exposición de los pacientes fuera de la estación polínica a través de fracciones de polen vehiculizadas por otras partículas que de alguna manera los reactivaría, como sucede, por ejemplo, en el mes de enero durante las tareas de recolección. Sin embargo, este fenómeno se presenta también en zonas con baja concentración de polen de olivo, lo que sugiere que los antígenos de olivo no están implicados en este proceso; y parece relacionarse más con la respuesta de los enfermos a otros desencadenantes del asma bronquial (contaminantes ambientales, cambios meteorológicos, infecciones víricas, etc.), que serían los responsables de la clínica persistente en el resto de las estaciones (Feo Brito, 2000). Por otro lado, se ha comprobado que cuando no se realiza la poda del Ligustrum, y se le deja florecer (su polinización es en el mes de julio, después de la del olivo), éste puede prolongar los síntomas de los pacientes alérgicos al olivo durante el verano (Feo Brito, 2000).

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Diagnóstico

     Para el diagnóstico de los procesos alérgicos producidos por el polen de olivo, es fundamental la realización de una historia clínica detallada, en la que se debe reseñar la edad de aparición de síntomas característicos, los antecedentes familiares de alergia y otras patologías respiratorias, la evolución de la sintomatología a lo largo de los años y, sobre todo, la época del año en que se manifiestan los síntomas. Éstos serán más prominentes cuando el paciente esté al aire libre y mejorarán en los días de lluvia, siendo su intensidad paralela a la cantidad de polen presente en el aire (González Minero, 1997).

     Las preparaciones utilizadas en el diagnóstico constituyen mezclas muy complejas de una gran variedad de componentes naturales, la mayor parte de los cuales no tiene un papel en la clínica. González-Quevedo (1984), en todos los extractos de polen de doce variedades de olivo, encuentra tres grupos de fracciones distintas, obtenidas mediante cromatografía por filtración en gel, correspondiendo la primera a moléculas con un gran peso molecular, de dudosa procedencia proteica; la segunda, a la zona de proteínas alergénicas y la tercera representada por moléculas de muy bajo peso molecular, correspondiente a materiales no inmunológicos y de degradación enzimática (González-Quevedo, 1984, Conde Hernández, 1994). El hecho de que exista una gran diversidad de concentraciones de los distintos alergenos del polen de olivo en cada extracto (desde el 20% de la Ole e 1 hasta el 0,05% de la Ole e 8) puede conducir a diagnósticos erróneos en aquellos pacientes sensibles sólo a alergenos minoritarios (Rodríguez, 2001).

     Cabe recordar que la Ole e 1 es el alergeno más importante del extracto utilizado en los prick, y que tiene una alta homología con alergenos importantes de otras especies relacionadas con la familia Oleaceae, lo que explica la reactividad cruzada observada en las pruebas cutáneas (De Cesare, 1993, Kalogeromitros, 2001). La presencia relativa del Ole e 1 en los extractos, que puede llegar a representar cerca del 20%, depende de la subespecie biológica, de factores ambientales del cultivo (temperatura local, riqueza del suelo), del estado de germinación del polen en el momento de la recolección, etc. (Rodríguez, 2000).

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Inmunoterapia

     El hecho antes comentado de que exista una diversidad de concentraciones de los distintos alergenos del polen de olivo en cada extracto puede conducir a inmunizaciones defectuosas, únicamente reales frente a aquellos alergenos más representados en los extractos. Una inmunización con extracto de polen de olivo sólo sería eficaz frente a una sensibilización por la Ole e 1, no para el resto de los alergenos de este polen (Rodríguez, 2001).

     Por otro lado, en los extractos de polen de olivo, al igual que en los de otros pólenes, existen una serie de productos indeseables, que pueden ejercer un efecto coadyuvante o, por el contrario, enmascarar ciertos alergenos del extracto, en su capacidad de unir IgE. El polen de olivo posee una gran cantidad de lípidos que deben extraerse con disolventes orgánicos antes de proceder a la preparación del extracto salino de proteínas (Rodríguez, 2001).

     En una primera fase, se suministran dosis crecientes del extracto hasta alcanzar una dosis máxima tolerada por el paciente y se continúa con dosis de mantenimiento mensual (González Minero, 1997). La fase de iniciación se puede hacer bien siguiendo una pauta convencional, que tiene un buen nivel de seguridad pero que según algunos autores es arbitraria y no obedece a ningún fundamento, aunque se tiene una amplia experiencia de uso (Moreno, 2001), o bien con otro tipo de pautas, semirrápidas, agrupadas o cluster, que han demostrado ser eficaces y seguras. En una reciente comunicación de Barasona y cols. (2001), se señala el buen nivel de tolerancia en un grupo de pacientes al aplicarles una pauta cluster con extractos de polen de olivo; sin embargo, Gómez y cols. (2000), en un trabajo en el que pretendían estudiar la seguridad de una pauta cluster de inmunoterapia en pacientes con asma bronquial por olea europaea, concluyen que la diferencia en el número total de reacciones adversas encontradas con la administración de inmunoterapia en pauta cluster, obliga a realizar un mayor control y seguimiento de los pacientes, aunque en su opinión no invalida éste procedimiento. Moreno y cols. (2001) en un trabajo sobre pautas cluster (pauta agrupada de 4 visitas y 12 dosis) con extractos acuosos de polen de olivo, señalan que el análisis de las reacciones observadas por ellos, sugiere que las reacciones locales no son efectos preocupantes desde el punto de vista pronóstico. Las reacciones locales se trataron fácilmente con frío local o algún antihistamínico, pero a veces condicionaron la ralentización de la pauta en evitación de molestias o alarma al paciente, y fueron la causa de buena parte del aumento del número global de dosisvisitas sobre lo previsto (los autores consideran que el uso de extractos más estables que los acuosos –depot– y la reducción del número de dosis agrupadas en cada visita podrían contribuir a resolver este inconveniente). Señalan, además, que los niveles de seguridad obtenidos por ellos no son comparables con los obtenidos por otros autores, por diferencias en los diseños de las pautas o en los propios extractos, pero constituyen una confirmación de la conclusión extraída de otras experiencias obtenidas en España, en el sentido de que las pautas agrupadas por pólenes de Olea son aceptables desde el punto de vista de su seguridad y, además, mejorables en el futuro inmediato. Justicia y cols. (2001), en una comunicación, concluyen que las distintas pautas agrupadas utilizadas por ellos en la fase de iniciación, con extractos de Olea europaea cuantificada en unidades de masa, son viables para la inmunoterapia de rutina y es una alternativa válida a la convencional, aunque es necesario ensayar nuevas pautas.

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Epidemiología de la polinosis a olivo en Sevilla

     En primer lugar, vamos a ver la proporción de pacientes con sensibilidad a polen de olivo con respecto a otros pólenes en una muestra de 200 pacientes a los que se les realizaron test cutáneos durante el año 2000. Dentro de los sensibles a polen, vamos a ver el porcentaje de sensibles al polen de olivo con respecto a otros pólenes.

     En segundo lugar, dentro de una muestra de pacientes con hipersensibilidad cutánea al polen de olivo, veremos el porcentaje de pacientes que son monosensibles y el porcentaje de pacientes que tiene otras sensibilidades, bien a pólenes (sobre todo de gramíneas y chenopodium), bien a hongos y/o ácaros.

     En tercer lugar, vamos a averiguar dos datos demográficos, la proporción de mujeres y de varones en cada grupo, y el porcentaje por edades.

     Finalmente, vamos a estudiar la media de polen de olivo atmosférico recogido a diario en los últimos 10 años (1991-2000), con las medias por decanas (10 días) en cada mes y de cada año, y el total de granos de polen recogido en cada mes y cada año

Material y Métodos

     La selección de pacientes se hará a partir de los tests cutáneos realizados entre el 1 enero del 2000 y el 31 de diciembre del 2000 en la Unidad de pruebas vivo de nuestro servicio. Las pruebas cutáneas se han realizado siguiendo la metodología propuesta por el subcomité de pruebas cutáneas de la EAACI. Se han considerado positivas todas aquellas pápulas con un diámetro medio igual o superior a 3 mm y con un resultado del control negativo de 0 mm (Chaparro y Conde, 1999). A partir de estos datos, se realizará el recuento de aquellos pacientes con tests cutáneos positivos a polen de olivo monosensibles y polisensibles (del total de test cutáneos realizados en este intervalo de tiempo se excluirán todos aquellos con test negativos al polen de olivo). Del total de test cutáneos realizados, extraeremos una muestra aleatoria de 200 pacientes para ver la incidencia de sensibilidad a pólenes, ácaros, epitelios y hongos.

     Por lo que respecta al recuento de los pólenes se ha realizado siguiendo las normas de la EAACI y utilizando un colector volumétrico de Burkard, con un flujo de 10 l/min, situado a 18 metros del nivel del suelo, en la terraza de nuestro hospital, que se encuentra situado en la parte noroeste de la ciudad, siendo el edificio más alto de los alrededores y estando considerablemente de parques o jardines así como de agrupaciones de árboles cercanos (Chaparro y Conde, 1999).

Resultados

     De una muestra de 200 pacientes elegidos aleatoriamente, destacaron, entre todas las alergias polínicas, los casos de hipersensibilidad in vivo al extracto de polen de olivo, con un 27,5 % de incidencia, seguida de la hipersensibilidad in vivo a un extracto de mezcla de gramíneas (27 %) y a uno de Dactilys (18 %). Por número de pacientes con sensibilidad a pólenes destacó el de olivo, con una incidencia del 27,5%. En cuanto a polisensibilizaciones, destacaron en primer lugar las sensibilizaciones al polen de olivo (67,9 %), y en segundo lugar las sensibilización a un extracto de mezcla de gramíneas (66,6 %). Sin embargo, en cuanto a las monosensibilizaciones, el mayor número correspondió de nuevo al polen de olivo (44,4 %) pero seguido en esta ocasión por el polen de Chenopodium (22,2 %).

     De una muestra de 2.042 pacientes con tests cutáneos positivos al polen de olivo, hay 1.854 polisensibilizados, lo que supone un 90,79 % del total, y tan sólo 188 monosensibles, lo que supone un 9,21% del total. Orta y cols. (2001), en el Hospital “El Tomillar” de Sevilla, obtienen un porcentaje de polisensibilizados del 88 % y un porcentaje de monosensibilizados del 12%.

     En los polisensibles hay 850 hombres (45,85 %) y 1004 mujeres (54,15 %); y dentro de los monosensibles 88 hombres (46,28 %) y 100 mujeres (53,72 %). En ambos grupos hay un discreto predominio del sexo femenino.

     Por edades, hemos obtenido los siguientes porcentajes: en pacientes menores de 6 años un porcentaje del 8,81 % (180 pacientes); en pacientes entre los 6 y 14 años un porcentaje del 25,61 % (523 pacientes); en pacientes entre 15 y 30 años un porcentaje del 39,91 % (815 pacientes), y entre los mayores de 30 años un porcentaje del 25,56 % (522 pacientes).

     En cuanto a las asociaciones con otros alergenos, la asociación más frecuentemente encontrada ha sido con el polen de gramíneas, un 42,85 % (875 pacientes). La asociación más frecuente encontrada por Chaparro y Conde (1999), en Sevilla, en 1995, también fue esta, con un porcentaje del 37 %. Otras asociaciones encontradas han sido: 1) con los ácaros del polvo doméstico, un 10,58 % (216 pacientes); 2) con los ácaros y el polen de Chenopodium, un 1,57 % (32 pacientes); 3) con los ácaros y el polen de gramíneas, un 13,76 % (281 pacientes); 4) con los ácaros y el polen de gramíneas y Chenopodium, un 3,18 % (65 pacientes); 5) con el polen del Chenopodium un 1,57 % (32 pacientes); 6) con el polen de las gramíneas y el Chenopodium un 20,66 % (422 pacientes); y 7) otras asociaciones, un 5,82 % (119 pacientes).

     Con respecto a la media de polen de olivo atmosférico recogido a diario en los últimos 10 años (1991-2000), con las medias por decanas (10 días) en cada mes y de cada año, y el total de granos de polen recogido en cada mes las gráficas adjuntas hablan por sí solas. Cabe recordar que la floración y polinización suele acontecer en mayo-junio, aunque el periodo de máxima concentración polínica suele ser bastante breve, y que en España la polinización de la Olea se prolonga durante los meses de abril a julio, comenzando casi un mes antes en las provincias más meridionales (Elche), y siendo globalmente el mes más álgido mayo-junio (depende del año), alcanzándose los niveles máximos de polen entre la segunda quincena de mayo y pri-mera de junio, favorecidos por el incremento de las temperaturas al final de la primavera (Feo Brito y cols. 2000). En Sevilla, de forma general, los meses más álgidos son abril y mayo, aunque en junio suelen verse algunos granos de polen, sobre todo en la primera decana, aunque en 1993 y 1998 la cantidad media de polen atmosférico fue mayor en la segunda. En cifras totales de polen, se observa una máxima incidencia en la tercera decana de abril y primera de mayo, donde se han alcanzado hasta 2.008 granos de polen. En 1993 hubo muy poca concentración polínica en abril, con un sólo pico importante en el mes de mayo. Dentro de abril la máxima concentración polínica se suele observar en la tercera decana del mes, y en mayo en la primera. En 1992, aunque se cumplió esta observación se aprecian niveles muy bajos de polen y un aumento súbito e importante en la tercera decana del mes de abril. Destacar también el hecho de que en 1996 se registraron unos niveles elevados (con respecto al resto de los años) de polen (hasta 93 granos de media) en el mes de junio.

     Es característico de este polen que presente amplias variaciones interanuales en su presencia atmosférica (Subiza, 1998). Se ha descrito que la concentración atmosférica anual de polen de olivo puede relacionarse con el llamado “fenómeno de la alternancia de cultivos” (figura 1), por el que se alternan años con numerosas emisiones de polen con otros en los que se observa una escasa concentración polínica (Corsico, 1993). En Sevilla se constata este fenómeno. Si observamos los gráficos en 1992, el pico máximo medio que se alcanzó fue de 230 granos de polen, sin embargo en 1993 fue de 462 (si bien en general, las concentraciones polínicas fueron bajas ese año), en 1994 de 266, en 1995 de 343 (aunque en general se puede decir lo mismo que en el año 1993), en 1996 de tan sólo 123, en 1997 de 577, en 1998 de 133, en 199 de 584, en el 2000 de 215 y en el 2001 de 242. Como se aprecia, hay grandes oscilaciones entre los picos de máxima incidencia entre cada año. Es curioso el hecho de que los meses con menores picos de incidencia la polinización es más mantenida. Por ejemplo, llama mucho la atención el año 1996, donde se alcanzó un pico máximo medio de 123, pero ya se empezó a observar polen desde principios de marzo y se mantuvo, aún bajas concentraciones, hasta la primera decana de julio; y el año 1998, donde pese a haberse alcanzado un pico máximo de incidencia de tan sólo 133 granos ya se empezó a observar polen desde finales de marzo y se mantuvo, aún bajas concentraciones, hasta la tercera decana de julio.

Polen de Olea

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Conclusiones

     a) Dentro de las alergias a pólenes, la más prevalente es la de polen de olivo, tanto polisensibilizados como en monosensibles, muy por encima, en este caso, del Chenopodium. Por otro lado, en la mayoría de los casos, la sensibilización al polen de olivo se asocia con otras sensibilizaciones.
     b) En nuestro entorno, tanto en mono como en polisensibilizados hay un discreto predominio de incidencia del sexo femenino.
     c) Por edades, la máxima incidencia se da entre los 15 y 30 años.
     d) En cuanto a las asociaciones con otros alergenos, la asociación más frecuentemente encontrada ha sido con el extracto de mezcla de gramíneas. Otras asociaciones encontradas han sido con los ácaros del polvo doméstico.

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REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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